Aðferð við ófrjósemisaðgerð etýlenoxíðs

(1) Samkvæmt prófkröfunum skaltu undirbúa grófjöðrunina og bakteríusneiðar af bacillus subtilis var. subtilis var. Níger. Bakteríusneiðarnar eru innsiglaðar í tvöföldu lag pólýetýlen plastpoka, 2 sneiðar á poka . 20 töskur eru notaðar við hvert próf.
(2) Settu eitt stig í innra, miðju og ytri lögum susterizer, samtals 9 stig. Settu einn poka í miðjan hvern punkt, samtals 18 poka af prófunarsneiðum. Settu annan poka (2 sneiðar) af bakteríusneiðum við stofuhita sem jákvæða stjórn.
(3) Framkvæmdu ófrjósemisaðgerð etýlenoxíðs við fullan álagsskilyrði í samræmi við styrk etýlenoxíðs, verkunartíma, hitastig og rakastig í skápnum sem tilgreindur er í leiðbeiningarhandbókinni. Fullt álag fer eftir tilgangi dauðhreinsunarinnar. Eftir meðferðina skaltu taka bakteríusneiðarnar, flytja þær í 5 ml næringarefni seyði ræktunarmiðils og rækta þær í 37 gráðu útungunarvél. Fylgstu með lokaniðurstöðum eftir 7 daga (eigindlegt menningarpróf).
Fyrir næringarefni seyði rör með niðurstöðum sem eru erfiðar til dóms skaltu taka 0,2 ml af sviflausninni og sæta næringarefni agarplötunnar. Notaðu sæfða L staf til að dreifa jafnt og settu í 37 gráðu útungunarvél fyrir menningu. Eftir 48 klukkustundir skaltu blettið smear og fylgstu með formgerð nýlendunnar undir smásjá, eða framkvæmdu önnur próf til að ákvarða hvort vöxtur sé eða hvort vöxturinn sé prófbakteríurnar. Ef það er ekki prófbakteríurnar ætti að endurtaka prófið.
(4) Meðan á prófinu stendur ætti að setja upp eigindlegar og megindlegar jákvæðar samanburðarhópar og neikvæðir samanburðarhópar á sama tíma.
(5) Fyrir megindlega jákvæða samanburðarhópinn, settu sama hóp af prófunarsneiðum við stofuhita. Eftir að sótthreinsunar- eða ófrjósemisprófunarhópurinn hefur náð tilgreindum aðgerðartíma, setjið strax tvo stykki af bakteríusneiðunum í prófunarrörum sem innihalda 5,0 ml PBS og hristu hvor í 80 sinnum. Taktu þvottalausnina og teldu lifandi bakteríuræktina samkvæmt aðferðinni sem sýnd er í 2.1.1.3.
(6) Fyrir eigindlegan jákvæða samanburðarhóp, settu prófunarbakteríusneiðarnar frá sama lotu við stofuhita. Eftir að ófrjósemisprófunarhópurinn hefur náð tilgreindum aðgerðartíma, sáð 2 af bakteríusneiðunum í 5,0 ml af næringarefni seyði miðli, settu þær í útungunarvél fyrir eigindlega ræktun og fylgstu með því hvort það sé bakteríuvöxtur.
(7) Fyrir neikvæða samanburðarhópinn, sáð 2 ósamþykktri sýnishornum úr sömu lotu í 5,0 ml af næringarefni seyði miðli og settu óeðlilega næringarefni seyði miðil í útungunarvél fyrir eigindlega ræktun til að fylgjast með því hvort um vöxt baktería sé.
(8) Prófið er endurtekið 5 sinnum.
(9) Í hverju af 5 prófunum ætti endurheimt bakteríufjöldi jákvæðra stjórnunarsneiðar að vera á milli 5 × 10 CFU/sneiðar og 5 × 10 CFU/sneið; Eigindlegur jákvæður samanburðarhópurinn ætti að hafa góðan bakteríuvöxt; og neikvæða stjórnin ætti ekki að hafa neinn bakteríuvöxt. Ef jákvæðar eða neikvæðar niðurstöður stjórnunar uppfylla ekki ofangreindar kröfur verður prófið ógilt og endurtekið.
Matsreglugerðir
Í fimm ófrjósemisprófunum hafði megindlegur jákvæður samanburðarhópurinn í hverju prófi greint og endurheimt bakteríufjölda 5 × 10 CFU/stykki til 5 × 10 CFU/stykki; Eigindlegur jákvæður samanburðarhópurinn hafði góðan bakteríuvöxt. Neikvæða stjórnin ætti ekki að hafa neinn bakteríuvöxt. Þegar allir prófunarbakteríur hafa engan bakteríuvöxt er ófrjósemisaðgerðin talin hæf.
Varúðarráðstafanir
(1) Hitastig og rakastig hafa mikil áhrif á ófrjósemisáhrif etýlenoxíðgas, þannig að viðkomandi skilyrðum í prófinu ætti að vera stranglega stjórnað.
(2) etýlenoxíðvökvi getur leyst upp pólýetýlen, pólývínýlklóríð osfrv., Og ekki ætti að dreypa vökva þess á slíkum hlutum. Etýlenoxíð, hvort sem það er vökvi eða gas, getur skemmt frumuafurðir, svo ætti að gæta þess meðan á prófinu stendur.
(3) Etýlenoxíð er eldfimt og sprengilegt. Gera skal ráðstafanir á eld og sprengingu á aðgerðasvæðinu og ekki ætti að leyfa opinn loga og rafmagns neisti.
(4) Innöndun óhóflegs etýlenoxíðgas getur valdið eitrunareinkennum eins og höfuðverk og uppköstum og í alvarlegum tilvikum getur það valdið lungnabjúg. Vinnuumhverfið ætti að hafa góða loftræstingu. Á 8 tíma vinnudeginum ætti etýlenoxíðstyrkur ekki að fara yfir 1,82 mg/m3 (1 ppm) og útsetningarstyrkur við 15 mínútna verkið ætti ekki að fara yfir 9,1 mg/m3 (5,0 ppm). Ef eitrunareinkenni koma fram skaltu yfirgefa svæðið strax. Í vægum tilvikum, andaðu fersku lofti þar til einkennin hverfa; Í alvarlegum tilvikum, sendu á sjúkrahús til meðferðar í tíma.